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大鼠心肌細胞分離和培養(yǎng)

大鼠心肌細胞分離和培養(yǎng)
心肌細胞分離
  根據(jù)心肌細胞(大鼠心肌細胞)和非心肌細胞貼壁時間的不同采用2小時差速貼壁,分別獲得心肌成纖維細胞和心肌細胞。心肌細胞按1*106個細胞/ml種于50ml培養(yǎng)液中,培養(yǎng)的前2天在心肌細胞培養(yǎng)液中加入5-溴脫氧嘧啶核苷0.1mmol/l,以抑制非心肌細胞增殖,所有培養(yǎng)的心肌細胞均每2天換液一次。
  心肌細胞的無血清培養(yǎng)
  當(dāng)心肌細胞(大鼠心肌細胞)培養(yǎng)24小時后換無血清培養(yǎng)液(含DMEM培養(yǎng)液,胰島素10?g/ml,鐵蛋白10?g/ml,維生素C100?g/L維生素B121.5µmol/L)繼續(xù)培養(yǎng)48小時,每隔8小時換液一次,盡量保持各添加成分濃度不變,*后收集細胞,進行測定。

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